凱氏定氮儀的工作原理及注意事項
凱氏定氮儀實驗精度的影響因素
凱氏定氮儀是一款自動加酸加堿加稀釋液的蒸餾裝置,滴定過程是需要手動完成,并通過人工計算氮含量的凱氏定氮儀器。凱氏定氮儀適用于食品、飲料、醫藥、農林漁業、礦山、化工等生產企業,以及高等院校、科研院所、環境監測、土肥站、農機站、質量監督檢驗等科研檢測單位對食品、乳制品、天然橡膠、乳膠、種子、土壤、植株、飼料、礦石、污泥及化學沉淀物等樣品中對蛋白質含量的智能化測定。
凱氏定氮儀采用廣泛認可的食品蛋白質含量檢測方法—凱氏定氮法。凱氏定氮儀是分析有機化合物含氮量的常用方法,其原理是首先將含氮有機物與濃硫酸共熱,經一系列的分解、碳化和氧化還原反應等復雜過程,zui后有機氮轉變為無機氮硫酸銨,這一過程稱為有機物的消化。消化完成后,將消化液轉入凱氏定氮儀反應室,加入過量的濃氫氧化鈉,將NH4+轉變成NH3,通過蒸餾把NH3驅入過量的硼酸溶液接受瓶內,硼酸接受氨后,形成四硼酸銨,凱氏定氮儀然后用標準鹽酸滴定,直到硼酸溶液恢復原來的氫離子濃度。因此凱氏定氮法必須分三步進行,分別為:消化、蒸餾和吸收、滴定。
凱氏定氮儀可檢測谷物、食品、飼料、水、土壤、淤泥、沉淀物和化學品中的氮和蛋白質,因此也被稱為蛋白質測定儀。凱氏定氮儀作為測定蛋白質儀器,廣泛應用于乳與乳制品中蛋白質的含量的測定。凱氏定氮儀具有高靈敏度,分析速度快,應用范圍廣,所需試樣少,設備和操作比較簡單等特點。凱氏定氮儀是目前使用zui廣泛測定乳與乳制品中蛋白質的儀器。
檢測樣品氮含量,如果你選擇的是凱氏定氮儀,那么*步是消解樣品,第二步是蒸餾收集氨氣的過程,第三步是滴定計算氮含量結果。不管凱氏定氮儀經歷發展到什么階段,只要是凱氏法,都必須經過前面提到的三個步驟。影響回收率的原因必然跟這三步有密切的關系。終結原因如下:
1.消解過程中,消解溫度過低或者時間不足,樣品未*消解。
2.鹽酸或則硫酸標準溶液放置時間過長,造成溶度不準。(zui長不超過1個月必須進行重新配置)
3.定氮儀蒸餾裝置冷凝管或防濺管有破損,產生的氨氣泄漏。
4.收集液太少,未能沒過接收管出口。
5.氫氧化鈉溶液用量過少,造成樣品液中的酸性無法進行*中和。(凱氏定氮儀實驗要求氫氧化鈉用量必須過量添加)
6.鹽酸或則硫酸標準溶液濃度太高,少一滴不到中性,多一滴則過頭。(手動滴定時容易出現回收率偏低)
7.收集氨氣的收集液溫度超過37度時,氨氣容易被逃逸。
在做樣品檢測試驗時,請嚴格按照凱氏定氮儀操作規程,包括消解時的溫度設置,催化劑的配比規則,消解時間等等,其次不管是手動滴定的半自動定氮儀,還是自動滴定打印計算數據的凱氏定氮儀,蒸餾時堿液必須過量,*反應完成,實時觀察蒸餾時氨氣被收集的溫度,顏色的變化,zui后是滴定時,標準酸濃度的配比,滴定泵前期的校準,如果是手動滴定時注意搖晃收集瓶手法等等,任何一個細節都會導致凱氏定氮儀回收率偏低。